SVEA Cyano液相色譜柱在使用前，最好進行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照液相色譜柱出廠報告中的條件進行，只有這樣，測得的結果才有可比性。

 

　　1.樣品的前處理：

　　①最好使用流動相溶解樣品；

　　②使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產生不可逆吸附的雜質；

　　③使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質；

 

　　2.流動相的配制：

　　液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的，因此，要求流動相具備以下的特點：

　　①流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中；

　　②流動相具有一定惰性，與樣品不產生化學反應；

　　③流動相的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果；同時，降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命；

　　④流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應，如使用UV檢測器，最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制；

　　⑤流動相沸點不要太低，否則容易產生氣泡，導致實驗無法進行；

　　⑥在流動相配制好后，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發生作用。

 

　　3. 流速的選擇：

　　因柱效是柱中流動相線性流速的函數，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的SVEA Cyano液相色譜柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。對內徑為4.6mm的液相色譜柱，流速一般選擇1mL/min，對于內徑為4.0mm柱，流速0.8mL/min為佳。當選用最佳流速時，分析時間可能延長。可采用改變流動相的洗滌強度的方法以縮短分析時間。

 

　　4. 流動相使用注意事項：

　　①由于甲醇廉價，對于反相柱推薦使用甲醇體系；

　　②對于正相柱推薦使用沸程為30-60 ℃的石油醚或提純后的己烷作流動相，沒有提純的己烷不得使用。用水最好使用超純水，去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質，有可能影響分析結果；

　　③含水流動相最好在實驗前配制，尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動相不要過夜。最好加入NaN3，防止細菌生長；

　　④流動相要求使用0.45μm濾膜過濾，除去微粒雜質；

　　⑤使用HPLC級溶劑配制流動相，使用合適的流動相可延長SVEA Cyano液相色譜柱的使用壽命，提高柱性能。